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            了解一下abcam抗體防止降解、污染的方法
            更新時間:2021-03-17   點擊次數(shù):1549次
              今天讓我們一起來了解一下abcam抗體防止降解、污染的方法,話不多說一起來看看吧。
             
              1、防止降解
             
              抗體試劑稀釋至工作濃度后,建議及時使用,不建議對稀釋后的抗體進行長時間保存。如果必須保存,建議保存于4℃并于一周以內(nèi)使用。
             
              一般而言,蛋白質(zhì)濃度高于1mg/ml時更不容易降解,因此部分抗體試劑中加入了牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑來防止降解。加入的蛋白質(zhì)還能盡可能減少抗體結(jié)合到容器壁上造成的損失。
             
              需要注意的是,請勿向?qū)⒁M行偶聯(lián)的抗體中加入蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,因為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑會與抗體競爭,降低偶聯(lián)效率。
             
              2、防止污染
             
              為了防止微生物污染,可將*作為抗菌劑加入抗體工作液中,保持終濃度為0.02%(w/v)。Abcam的多款抗體中都含有*,濃度范圍為0.02%-0.05%??贵w數(shù)據(jù)表的保存緩沖液部分對此有說明。
             
              此外,如果要對活細胞進行染色或處理,或進行體內(nèi)研究時,請務必使用不含*的試劑??咕鷦钄嗉毎仉娮觽鬟f系統(tǒng),對大部分生物體都有毒害作用。
             
              高濃度的*會干擾涉及胺基的所有偶聯(lián)反應,因此必須在進行偶聯(lián)反應之前將其去除?;蚩蛇x用0.01%*(硫柳汞),這種抗菌劑不含伯胺。
             
              抗體溶液中的*可通過透析或凝膠過濾去除。IgG的分子量為150,000Da(IgM約為600,000Da),*的分子量為65Da。截留分子量為14,000Da的微透析裝置可去除*。
             
              透析過程在燒杯中(置于磁力攪拌器上,溫度保持4℃)進行,每毫升抗體使用至少1升預冷的PBS,攪拌透析裝置6小時。更換PBS兩次,每次更換后均攪拌至少6小時。如有可能,所有材料都應滅菌,并且應在無菌條件下處理所得制備物。
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